質保3年只換不修,廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司。
羅氏實時熒光定量PCR儀是一款基于聚合酶鏈式反應(PCR)技術的高精度核酸檢測設備。它通過熒光信號的實時采集與分析,實現DNA或RNA擴增過程的動態監測。與傳統PCR不同,實時熒光定量PCR不僅能判斷目標序列是否存在,還能對其初始拷貝數進行精確定量,廣泛應用于醫學檢驗、食品安全、環境監測、分子生物學研究等領域。
該儀器采用高性能光學系統、溫度控制系統及智能化操作軟件,能夠在短時間內完成多通道、多樣本的同步檢測,具備高靈敏度、高重復性和穩定性,是科研與臨床實驗室常用的核心設備之一。
在進行開機操作前,必須完成一系列準備工作,以確保儀器處于良好運行狀態:
環境要求
實驗室溫度應保持在18℃至28℃之間,相對濕度不超過70%。
儀器應放置在穩固、平整、防震的實驗臺上,遠離強磁場和陽光直射。
避免與高功率電器(如離心機、電熱設備)共用電源插座,以防干擾信號。
電源與接地
使用符合儀器要求的穩壓電源,電壓波動不應超過±10%。
確保接地良好,接地電阻小于4Ω,以防止靜電干擾或電壓突變。
儀器檢查
檢查電源線、通訊線、熒光燈模塊及光纖接口是否連接牢固。
觀察儀器內部是否清潔,無積塵、液體殘留或異物。
樣品槽、反應板及耗材區域應干凈、干燥。
計算機及軟件準備
連接PCR儀與專用計算機,通過USB或局域網接口。
打開控制軟件,檢查驅動是否正常加載。
檢查上次實驗數據是否已保存完畢,確保存儲空間充足。
通電啟動
插上電源線,確認電源指示燈亮起。
按下主機電源鍵,儀器開始自檢。
自檢過程中,系統會檢測溫控模塊、光學模塊、風扇及數據連接狀態。若有異常,顯示屏會提示錯誤代碼,應根據說明書排查。
軟件啟動
自檢完成后,在計算機上雙擊“PCR控制系統”圖標啟動軟件。
軟件會自動識別連接的儀器型號、序列號及運行狀態。
檢查軟件主界面溫控系統、光路系統狀態是否顯示為“正常”。
若首次使用,應登錄管理員賬戶完成系統初始化設定。
溫控系統預熱
在主界面中點擊“溫控啟動”,系統將自動預熱至默認溫度。
一般情況下,反應模塊溫度穩定后,主界面顯示“Ready”。
預熱時間約為10-15分鐘,期間可準備樣品。
熒光燈模塊檢查
打開光學測試功能,檢查每個通道的激發光與發射光是否正常。
若某通道信號偏弱,可清潔光路鏡片或更換濾光片。
確保光學檢測系統靈敏、無噪聲干擾。
反應體系配制
根據實驗要求,配制PCR反應體系,包括模板、引物、探針、酶混合液及熒光染料。
嚴格按照說明書比例操作,避免氣泡產生。
樣品應在冰上操作,以減少酶活性變化。
加樣與封板
將反應液分裝至PCR反應管或96孔反應板中。
檢查每孔體積一致性,避免液面高低差異。
使用專用封板膜密封,防止蒸發與交叉污染。
將反應板置入儀器樣品槽中,注意定位方向正確。
新建實驗文件
在軟件中點擊“新建實驗”,輸入實驗名稱、日期及操作者信息。
選擇反應體系類型(如SYBR Green或TaqMan探針法)。
設置熒光通道及參考染料。
溫度循環參數設定
輸入預變性、退火、延伸等階段的溫度與時間。
設置循環次數,一般為35-45次。
可根據實驗需要調整升溫速率與熒光采集點。
數據采集設置
勾選實時熒光采集選項,選擇檢測通道。
設置閾值線及基線校正方式。
可啟用“熔解曲線分析”功能,用于產物特異性判斷。
啟動實驗
點擊“運行”按鈕,儀器開始反應。
軟件界面實時顯示熒光曲線及溫度變化。
實驗過程中請勿隨意開蓋或斷電。
自動保存與導出
實驗結束后,軟件會自動保存數據文件。
可導出為Excel、PDF或專用格式進行分析。
結果分析
查看擴增曲線是否平滑、閾值交點是否明顯。
檢查標準曲線的線性關系(R2≥0.99)。
根據Ct值計算樣品相對表達量或絕對拷貝數。
熔解曲線驗證
觀察熔解峰形態是否單一,判斷擴增產物特異性。
若出現多峰或拖尾,說明存在非特異性擴增,應優化引物或退火溫度。
實驗結束后等待降溫
儀器會自動降溫至安全溫度,一般為25℃以下。
不可強制關閉電源,以防損壞溫控系統。
退出軟件與斷電
關閉軟件并退出用戶賬戶。
關閉主機電源,再拔下電源線。
清潔與維護
使用無塵布擦拭儀器表面,保持干凈。
禁止使用有機溶劑清洗光學部件。
定期檢查風扇與濾網,防止灰塵堆積。
每周保養
清理樣品槽及反應孔周邊,保持無污染。
檢查熒光燈使用壽命,必要時更換。
每月檢測
使用標準模板進行性能驗證,確保擴增效率穩定。
檢查軟件版本,更新至最新穩定版。
安全事項
不得在帶電狀態下插拔模塊。
實驗過程中應佩戴防護手套與護目鏡。
若發生異常聲響或溫度波動,應立即停止運行并聯系廠家。
羅氏實時熒光定量PCR儀的開機流程看似簡單,但每一步都對結果的準確性至關重要。規范的操作不僅能延長儀器壽命,更能保障實驗數據的科學性與重復性。通過嚴格遵守開機、運行與維護步驟,實驗人員可最大限度地提升檢測效率,確保實驗室的高質量輸出。
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